-
Aromaterápiás tiszta, természetes eukaliptuszlevél illóolaj bőr- és testápoláshoz
Extrakciós vagy feldolgozási módszer: gőzdesztilláció
Desztillációs extrakciós rész: levél
Származási ország: Kína
Alkalmazás: Diffúz/aromaterápia/masszázs
Eltarthatóság: 3 év
Testreszabott szolgáltatás: egyedi címke és doboz, vagy az Ön igényei szerint
Tanúsítvány: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
Az eukaliptuszolaj reakcióba lép a nyálkával és fellazítja azt, így azonnal enyhülést nyújt a légszomj és más légzőszervi problémák esetén. Elég erős ahhoz, hogy rovarriasztóként működjön. Aromaterápiában használva tiszta gondolatokat biztosít. Terápiás előnyei antimikrobiális, antibakteriális, fertőtlenítő, görcsoldó és vírusellenes tulajdonságainak köszönhetők. Használja az eukaliptuszolajat különféle bőr- és egészségügyi problémákra. Eukaliptolt tartalmaz, amelyet cineolként is ismernek. Ez a vegyület támogatja az általános egészségét és közérzetét.
-
Természetes, tiszta, bio levendula illóolaj aromaterápiás bőrápoláshoz
Extrakciós vagy feldolgozási módszer: Gőzdesztilláció
Desztillációs extrakciós rész: Virág
Származási ország: Kína
Alkalmazás: Diffúz/aromaterápia/masszázs
Eltarthatóság: 3 év
Testreszabott szolgáltatás: egyedi címke és doboz, vagy az Ön igényei szerint
Tanúsítvány: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
100% tisztaságú természetes bio magnóliaolaj (Magnoliae Officmalis Cortex) illóolaj bőrápolásra
A Hou Po illata azonnal kesernyés és élesen csípős, majd fokozatosan mély, szirupos édességgel és melegséggel nyílik meg.
A Hou Po a Föld és a Fém elemekhez kötődik, ahol keserű melege erősen hat a Qi és a száraz nedvesség levezetésére. Ezen tulajdonságai miatt a kínai gyógyászatban az emésztőrendszerben felhalmozódó pangás és stagnálás, valamint a tüdőt elzáró váladék okozta köhögés és zihálás enyhítésére használják.
A Magnolia Officinials egy lombhullató fa, amely Szecsuán, Hubei és Kína más tartományainak hegyeiben és völgyeiben őshonos. A hagyományos kínai orvoslásban használt, erősen aromás kérget a szárakról, ágakról és gyökerekről távolítják el, és áprilistól júniusig gyűjtik. A vastag, sima, olajban gazdag kéreg belső oldalán lilás színű, kristályszerű csillogással.
A gyakorlók fontolóra vehetik a Hou Po és a Qing Pi illóolaj kombinálását fejjegyként a felhalmozódások feloldására irányuló keverékekben.
-
OEM egyedi csomagolású természetes Macrocephalae Rhizoma olaj
Hatékony kemoterápiás szerként az 5-fluorouracil (5-FU) széles körben alkalmazható a gyomor-bél traktus, a fej, a nyak, a mellkas és a petefészek rosszindulatú daganatainak kezelésére. Az 5-FU a klinikai vizsgálatokban az első vonalbeli gyógyszer a vastagbélrák kezelésében. Az 5-FU hatásmechanizmusa az, hogy blokkolja az uracil-nukleinsav timin-nukleinsavvá történő átalakulását a tumorsejtekben, majd befolyásolja a DNS és RNS szintézisét és javítását, így éri el citotoxikus hatását (Afzal et al., 2009; Ducreux et al., 2015; Longley et al., 2003). Az 5-FU azonban kemoterápia által kiváltott hasmenést (CID) is okoz, ami az egyik leggyakoribb mellékhatás, amely sok beteget sújt (Filho et al., 2016). Az 5-FU-val kezelt betegeknél a hasmenés előfordulása elérte az 50–80%-ot, ami komolyan befolyásolta a kemoterápia előrehaladását és hatékonyságát (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). Következésképpen kiemelt fontosságú hatékony terápiát találni az 5-FU által kiváltott CID kezelésére.
Jelenleg a nem gyógyszeres és a gyógyszeres beavatkozásokat bevezették a CID klinikai kezelésébe. A nem gyógyszeres beavatkozások közé tartozik az ésszerű étrend, valamint a só, cukor és egyéb tápanyagok pótlása. A loperamid és az oktreotid gyógyszereket gyakran alkalmazzák a CID hasmenés elleni terápiájában (Benson et al., 2004). Ezenkívül a különböző országokban népi gyógyszereket is alkalmaznak a CID kezelésére, saját, egyedi terápiával. A hagyományos kínai orvoslás (HKO) egy tipikus népi orvoslás, amelyet több mint 2000 éve gyakorolnak Kelet-Ázsia országaiban, beleértve Kínát, Japánt és Koreát (Qi et al., 2010). A HKO szerint a kemoterápiás gyógyszerek Qi-fogyasztást, léphiányt, gyomordiszharmóniát és endofita nedvességet okoznak, ami a bélrendszer vezetési diszfunkciójához vezet. A HKO elmélete szerint a CID kezelési stratégiájának főként a Qi-pótláson és a lép erősítésén kell alapulnia (Wang et al., 1994).
A szárított gyökerekAtractylodes macrocephalusKoidz. (AM) ésPanax ginzengA CA Mey. (PG) a hagyományos kínai orvoslás tipikus gyógynövényei, amelyek ugyanolyan hatással vannak a Qi kiegészítésére és a lép erősítésére (Li et al., 2014). Az AM-t és a PG-t általában gyógynövénypárosként használják (a kínai gyógynövény-kompatibilitás legegyszerűbb formája), a Qi kiegészítésére és a lép erősítésére a hasmenés kezelésére. Például az AM-t és a PG-t klasszikus hasmenés elleni készítményekben dokumentálták, mint például a Shen Ling Bai Zhu San, a Si Jun Zi Tang és a ...Taiping Huimin Heji Ju Fang(Song dinasztia, Kína) és Bu Zhong Yi Qi Tang származóPi Wei Lun(Yuan-dinasztia, Kína) (1. ábra). Számos korábbi tanulmány beszámolt arról, hogy mindhárom készítmény képes enyhíteni a CID-et (Bai et al., 2017; Chen et al., 2019; Gou et al., 2016). Ezenkívül korábbi tanulmányunk kimutatta, hogy a csak AM-t és PG-t tartalmazó Shenzhu kapszula potenciális hatással lehet a hasmenés, a vastagbélgyulladás (xiexie szindróma) és más gyomor-bélrendszeri betegségek kezelésében (Feng et al., 2018). Azonban egyetlen tanulmány sem tárgyalta az AM és a PG hatását és mechanizmusát a CID kezelésében, akár kombinációban, akár önmagukban.
A bélmikrobiotát ma már potenciális tényezőnek tekintik a hagyományos kínai orvoslás terápiás mechanizmusának megértésében (Feng et al., 2019). A modern tanulmányok azt mutatják, hogy a bélmikrobiota kulcsszerepet játszik a bél homeosztázisának fenntartásában. Az egészséges bélmikrobiota hozzájárul a bélnyálkahártya védelméhez, az anyagcseréhez, az immunhomeosztázishoz és -válaszhoz, valamint a kórokozók elnyomásához (Thursby és Juge, 2017; Pickard et al., 2017). A rendezetlen bélmikrobiota közvetlenül vagy közvetve károsítja az emberi test fiziológiai és immunfunkcióit, mellékhatásokat, például hasmenést okozva (Patel et al., 2016; Zhao és Shen, 2010). Kutatások kimutatták, hogy az 5-FU jelentősen megváltoztatta a bélmikrobiota szerkezetét hasmenéses egerekben (Li et al., 2017). Ezért az AM és a PM hatása az 5-FU által kiváltott hasmenésre a bélmikrobiota közvetítésével hozható összefüggésbe. Azonban az, hogy az AM és a PG önmagukban és kombinációban megelőzhetik-e az 5-FU által kiváltott hasmenést a bélmikrobiota modulálásával, még nem ismert.
Az AM és PG hasmenés elleni hatásainak és mögöttes mechanizmusának vizsgálata érdekében 5-FU-t használtunk hasmenéses modell szimulálására egerekben. Jelen munkánkban az egyszeri és kombinált adagolás (AP) lehetséges hatásaira összpontosítottunk.Atractylodes macrocephalusillóolaj (AMO) ésPanax ginzengA teljes szaponinok (PGS), az AM-ből és PG-ből kivont aktív komponensek hatása a hasmenésre, a bélrendszeri patológiára és a mikrobiális szerkezetre 5-FU kemoterápia után.
-
100% tisztaságú természetes Eucommiae Foliuml olaj illóolaj bőrápolásra
Eucommia ulmoides(EU) (kínaiul általában „Du Zhong”-nak nevezik) az eucommiaceae családba tartoznak, amely egy Közép-Kínában őshonos kis fanem.1]. Ezt a növényt széles körben termesztik Kínában gyógyászati jelentősége miatt. Körülbelül 112 vegyületet izoláltak az EU-ból, beleértve a lignánokat, iridoidokat, fenolokat, szteroidokat és más vegyületeket. A növény kiegészítő gyógynövénykészítményei (például a finom tea) bizonyos gyógyhatású anyagokat mutattak. Az EU levele nagyobb aktivitást mutat a kéreg, a virág és a termés tekintetében [2,3Az EU leveleiről kimutatták, hogy fokozzák a csontok és a test izmainak erősségét [4], ezáltal meghosszabbítja az életet és elősegíti a termékenységet az embereknél [5Az EU leveléből készült finom teakészítményről kimutatták, hogy csökkenti a zsírosságot és fokozza az energia-anyagcserét. A flavonoid vegyületek (mint például a rutin, a klorogénsav, a ferulinsav és a kávésav) antioxidáns aktivitást mutatnak az EU leveleiben.6].
Bár elegendő szakirodalom áll rendelkezésre az EU fitokémiai tulajdonságairól, kevés tanulmány foglalkozott az EU kérgéből, magjaiból, szárából és leveleiből kivont különféle vegyületek farmakológiai tulajdonságaival. Ez az áttekintő tanulmány részletes információkat nyújt az EU különböző részeiből (kéreg, magok, szár és levél) kivont különböző vegyületekről, valamint ezen vegyületek egészségjavító tulajdonságainak lehetséges felhasználásáról tudományos bizonyítékok alapján, így referenciaanyagot biztosítva az EU alkalmazásához.
-
Tiszta, természetes Houttuynia cordata olaj, Houttuynia cordata olaj, Lchthammolum olaj
A fejlődő országok többségében a lakosság 70-95%-a a hagyományos gyógyszerekre támaszkodik az alapellátásban, és közülük az emberek 85%-a növényeket vagy azok kivonatait használja hatóanyagként.1A növényekből származó új, biológiailag aktív vegyületek utáni kutatás általában a helyi szakemberektől származó specifikus etnikai és népi információkon alapul, és továbbra is fontos forrásnak tekintik a gyógyszerkutatásban. Indiában körülbelül 2000 gyógyszer növényi eredetű.2] Tekintettel a gyógynövények iránti széles körű érdeklődésre, a jelenlegi áttekintés aHouttuynia cordataA Thunb. naprakész információkat nyújt a szakirodalomban megjelenő botanikai, kereskedelmi, etnofarmakológiai, fitokémiai és farmakológiai vizsgálatokról.H. cordataA Thunb. a családhoz tartozik.Saururaceae-félék...és közismert nevén kínai gyíkfark. Ez egy évelő gyógynövény, amelynek tarackos rizómája két különböző kemotípussal rendelkezik.3,4A faj kínai kemotípusa áprilistól szeptemberig vad és félvad körülmények között található India északkeleti részén.5,6,7]H. cordataIndiában, különösen Assam állam Brahmaputra-völgyében kapható, és Assam különböző törzsei zöldségként, valamint hagyományosan különféle gyógyászati célokra használják.
-
100%-ban tiszta Arctium lappa olaj gyártója – Természetes mész Arctium lappa olaj minőségbiztosítási tanúsítvánnyal
Egészségügyi előnyök
A bojtorjángyökeret gyakran fogyasztják, de szárítva is teába áztatható. Jól működik inulinforrásként, ami egyprebiotikumrost, amely segíti az emésztést és javítja a bélrendszer egészségét. Ezenkívül ez a gyökér flavonoidokat (növényi tápanyagokat) is tartalmaz,fitokemikáliákés antioxidánsokat, amelyekről ismert, hogy egészségügyi előnyökkel járnak.
Ezenkívül a bojtorjángyökér más előnyökkel is járhat, mint például:
Csökkenti a krónikus gyulladást A bojtorjángyökér számos antioxidánst tartalmaz, például kvercetint, fenolsavakat és luteolint, amelyek segíthetnek megvédeni a sejteket a...szabad gyökökEzek az antioxidánsok segítenek csökkenteni a gyulladást az egész szervezetben.
Egészségügyi kockázatok
A bojtorjángyökér biztonságosan fogyasztható vagy teának fogyasztható. Ez a növény azonban nagyon hasonlít a belladonna csutkafélékhez, amelyek mérgezőek. Javasoljuk, hogy a bojtorjángyökeret csak megbízható eladóktól vásárolja meg, és tartózkodjon a saját kezű gyűjtéstől. Ezenkívül kevés információ áll rendelkezésre a gyermekekre vagy terhes nőkre gyakorolt hatásairól. Beszéljen orvosával, mielőtt a bojtorjángyökeret gyermekeknél vagy terhesség alatt használná.
Íme néhány további lehetséges egészségügyi kockázat, amelyet figyelembe kell venni a bojtorjángyökér használata esetén:
Fokozott kiszáradás
A bojtorjángyökér természetes vízhajtóként működik, ami kiszáradáshoz vezethet. Ha vízhajtókat vagy más vízhajtókat szed, ne szedjen bojtorjángyökeret. Ha ezeket a gyógyszereket szedi, fontos, hogy tisztában legyen más gyógyszerekkel, gyógynövényekkel és összetevőkkel, amelyek kiszáradáshoz vezethetnek.
Allergiás reakció
Ha érzékeny vagy allergiás reakcióid voltak a százszorszépekre, a parlagfűre vagy a krizantémokra, vagy ha volt már ilyen kórtörténeted, akkor fokozottan fennáll a bojtorjángyökérre adott allergiás reakció kockázata.
-
Nagykereskedelmi ár 100% tisztaságú AsariRadix Et Rhizoma olaj Relax Aromaterápia Eucalyptus globulus
Állatkísérletek és in vitro vizsgálatok vizsgálták a szaszafrász és összetevőinek lehetséges gombaellenes, gyulladáscsökkentő és szív- és érrendszeri hatásait. Klinikai vizsgálatok azonban hiányoznak, és a szaszafrász használata nem tekinthető biztonságosnak. A szafrolt, a szaszafrász gyökérkéregének és olajának fő összetevőjét az Egyesült Államok Élelmiszer- és Gyógyszerügyi Hivatala (FDA) betiltotta, beleértve az ízesítő- vagy illatanyagként való használatát is, és nem szabad belsőleg vagy külsőleg használni, mivel potenciálisan rákkeltő. A szafrolt a 3,4-metilén-dioximetamfetamin (MDMA), más néven „ecstasy” vagy „Molly” utcai nevén, illegális előállításához használták, és a szafrol és a szaszafrászolaj értékesítését az Egyesült Államok Kábítószer-ellenes Hivatala ellenőrzi.
-
Nagykereskedelmi ár 100% tisztaságú Stellariae Radix illóolaj (új) Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus
A Kínai Gyógyszerkönyv (2020-as kiadás) előírja, hogy az YCH metanolos kivonatának tartalma ne legyen kevesebb, mint 20,0% [2], további minőségértékelési mutatók meghatározása nélkül. A tanulmány eredményei azt mutatják, hogy mind a vad, mind a tenyésztett minták metanolos kivonatainak tartalma megfelelt a gyógyszerkönyvi szabványnak, és nem volt szignifikáns különbség közöttük. Ezért az index szerint nem volt látható minőségi különbség a vad és a tenyésztett minták között. A vad minták összes szterin- és összes flavonoidtartalma azonban szignifikánsan magasabb volt, mint a tenyésztett mintáké. A további metabolomikai elemzés a vad és a tenyésztett minták között bőséges metabolit-diverzitást mutatott ki. Ezenkívül 97 szignifikánsan eltérő metabolitot szűrtek ki, amelyek aKiegészítő táblázat S2Ezen jelentősen eltérő metabolitok között szerepel a β-szitoszterin (ID: M397T42) és a kvercetin származékok (M447T204_2), amelyekről kimutatták, hogy hatóanyagok. Korábban nem jelentett összetevők, mint például a trigonellin (M138T291_2), betain (M118T277_2), fusztin (M269T36), rotenon (M241T189), arktiin (M557T165) és logánsav (M399T284_2), szintén szerepeltek a differenciális metabolitok között. Ezek az összetevők különböző szerepet játszanak az antioxidációban, a gyulladáscsökkentésben, a szabad gyökök megkötésében, a rákellenes hatásban és az ateroszklerózis kezelésében, és ezért feltételezett új hatóanyagokat jelenthetnek a YCH-ban. A hatóanyagok tartalma határozza meg a gyógyászati anyagok hatékonyságát és minőségét [7]. Összefoglalva, a metanolos kivonatnak, mint az egyetlen YCH minőségértékelési indexnek, vannak korlátai, és a specifikusabb minőségi markerek további vizsgálatára van szükség. Jelentős különbségek voltak az összes szterol, az összes flavonoid és számos más eltérő metabolit tartalmában a vad és a termesztett YCH között; így potenciálisan voltak minőségi különbségek közöttük. Ugyanakkor az YCH-ban újonnan felfedezett potenciális hatóanyagok fontos referenciaértékkel bírhatnak az YCH funkcionális alapjainak tanulmányozásához és az YCH-erőforrások további fejlesztéséhez.
A valódi gyógyászati anyagok fontosságát régóta felismerik a származási régióban a kiváló minőségű kínai gyógynövények előállításához.8A kiváló minőség az eredeti gyógyászati anyagok alapvető tulajdonsága, és az élőhely fontos tényező, amely befolyásolja az ilyen anyagok minőségét. Amióta a YCH-t gyógyszerként kezdték használni, régóta a vadon élő YCH uralja. Miután a YCH-t sikeresen bevezették és háziasították Ningxiában az 1980-as években, a Yinchaihu gyógyászati anyagok forrása fokozatosan a vadon élőről a termesztett YCH-ra helyeződött át. Egy korábbi, az YCH forrásaival kapcsolatos vizsgálat szerint [9] és kutatócsoportunk terepi vizsgálata során jelentős különbségek mutatkoznak a termesztett és a vadon termő gyógyászati anyagok elterjedési területein. A vadon termő YCH főként a Sanhszi tartomány Ningxia Hui Autonóm Területén található, amely Belső-Mongólia és Közép-Ningxia száraz övezete mellett fekszik. Különösen a sivatagi sztyeppék a legmegfelelőbb élőhely ezeken a területeken a YCH növekedéséhez. Ezzel szemben a termesztett YCH főként a vadon termő elterjedési terület déli részén terjedt el, például Tongxin megyében (I. termesztési terület) és környékén, amely Kína legnagyobb termesztési és termelési bázisává vált, valamint Pengyang megyében (II. termesztési terület), amely egy délebbre fekvő területen található, és a termesztett YCH másik termőterülete. Ezenkívül a fenti két termesztett terület élőhelye nem sivatagi sztyeppék. Ezért a termelési mód mellett jelentős különbségek vannak a vadon termő és a termesztett YCH élőhelyében is. Az élőhely fontos tényező, amely befolyásolja a növényi gyógyászati anyagok minőségét. A különböző élőhelyek befolyásolják a másodlagos metabolitok képződését és felhalmozódását a növényekben, ezáltal befolyásolva a gyógyszerek minőségét [10,11]. Ezért a teljes flavonoidok és szterinek tartalmában, valamint az 53 metabolit expressziójában ebben a vizsgálatban talált jelentős különbségek a terepi gazdálkodás és az élőhelybeli különbségek eredményei lehetnek.A környezet egyik fő hatása a gyógyászati anyagok minőségére a kiindulási növények stresszének kiváltása. A mérsékelt környezeti stressz általában serkenti a másodlagos metabolitok felhalmozódását [12,13A növekedés/differenciálódás egyensúlyának hipotézise szerint, ha elegendő tápanyag áll rendelkezésre, a növények elsősorban növekednek, míg ha hiány van belőlük, a növények főként differenciálódnak és több másodlagos metabolitot termelnek [14A vízhiány okozta aszálystressz a száraz területeken élő növényeket érő fő környezeti stressz. Ebben a tanulmányban a termesztett YCH vízellátása bőségesebb, az éves csapadékmennyiség jelentősen magasabb, mint a vad YCH esetében (a termesztett I. vízellátása körülbelül kétszerese volt a vadénak; a termesztett II.é körülbelül 3,5-szerese a vadénak). Ezenkívül a vad környezetben a talaj homokos, míg a mezőgazdasági területeken agyagos talaj. Az agyaggal összehasonlítva a homokos talaj rossz vízmegtartó képességgel rendelkezik, és nagyobb valószínűséggel súlyosbítja az aszálystresszt. Ugyanakkor a termesztési folyamatot gyakran öntözés kísérte, így az aszálystressz mértéke alacsony volt. A vad YCH zord természetes, száraz élőhelyeken nő, ezért komolyabb aszálystressznek lehet kitéve.Az ozmoreguláció egy fontos fiziológiai mechanizmus, amelyen keresztül a növények megbirkóznak a szárazság okozta stresszel, és az alkaloidok fontos ozmotikus szabályozók a magasabb rendű növényekben [1].15A betainok vízben oldódó alkaloid kvaterner ammóniumvegyületek, és ozmoprotektánsként működhetnek. A szárazságstressz csökkentheti a sejtek ozmotikus potenciálját, míg az ozmoprotektánsok megőrzik és fenntartják a biológiai makromolekulák szerkezetét és integritását, és hatékonyan enyhítik a szárazságstressz által a növényekben okozott károkat [16Például aszálystressz alatt a cukorrépa és a Lycium barbarum betaintartalma jelentősen megnőtt [17,18A trigonellin a sejtnövekedés szabályozója, és szárazságstressz alatt meghosszabbíthatja a növényi sejtciklus hosszát, gátolhatja a sejtnövekedést és a sejttérfogat csökkenéséhez vezethet. Az oldott anyag koncentrációjának relatív növekedése a sejtben lehetővé teszi a növény számára az ozmotikus szabályozás elérését és fokozza a szárazságstresszel szembeni ellenállását [19]. JIA X [20] megállapította, hogy a szárazságstressz növekedésével az Astragalus membranaceus (a hagyományos kínai orvoslás egyik forrása) több trigonellint termelt, amely szabályozza az ozmotikus potenciált és javítja a szárazságstresszel szembeni ellenállást. A flavonoidokról azt is kimutatták, hogy fontos szerepet játszanak a növények szárazságstresszel szembeni ellenálló képességében [21,22Számos tanulmány megerősítette, hogy a mérsékelt szárazságstressz elősegítette a flavonoidok felhalmozódását. Lang Duo-Yong és munkatársai [23] összehasonlította a szárazságstressz YCH-ra gyakorolt hatását a terepi vízmegtartó képesség szabályozásával. Megállapították, hogy a szárazságstressz bizonyos mértékig gátolta a gyökerek növekedését, de közepes és súlyos szárazságstressz esetén (40%-os terepi vízmegtartó képesség) a YCH teljes flavonoidtartalma megnőtt. Eközben szárazságstressz alatt a fitoszterolok szabályozhatják a sejtmembrán fluiditását és permeabilitását, gátolhatják a vízvesztést és javíthatják a stresszel szembeni ellenálló képességet [24,25]. Ezért a teljes flavonoidok, teljes szterinek, betain, trigonellin és más másodlagos metabolitok fokozott felhalmozódása a vad YCH-ban összefüggésben állhat a nagy intenzitású szárazságstresszel.Ebben a tanulmányban KEGG-útvonal-dúsulási elemzést végeztünk azokon a metabolitokon, amelyekről megállapítottuk, hogy szignifikánsan különböznek a vad és a tenyésztett YCH között. A dúsított metabolitok közé tartoztak azok, amelyek az aszkorbát- és aldarát-anyagcserében, az aminoacil-tRNS bioszintézisében, a hisztidin-anyagcserében és a béta-alanin-anyagcserében vesznek részt. Ezek az anyagcsere-utak szorosan kapcsolódnak a növények stresszrezisztencia-mechanizmusaihoz. Ezek közül az aszkorbát-anyagcsere fontos szerepet játszik a növények antioxidáns-termelésében, a szén- és nitrogén-anyagcserében, a stresszrezisztenciában és más fiziológiai funkciókban [26]; az aminoacil-tRNS bioszintézise fontos útvonal a fehérjeképződéshez [27,28], amely részt vesz a stresszrezisztens fehérjék szintézisében. Mind a hisztidin, mind a β-alanin útvonal fokozhatja a növények környezeti stresszel szembeni toleranciáját [29,30Ez tovább jelzi, hogy a vad és a tenyésztett YCH metabolitjai közötti különbségek szorosan összefüggtek a stresszrezisztencia folyamataival.A talaj a gyógynövények növekedésének és fejlődésének anyagi alapja. A talajban található nitrogén (N), foszfor (P) és kálium (K) fontos tápanyagok a növények növekedéséhez és fejlődéséhez. A talaj szerves anyaga N-t, P-t, K-ot, Zn-t, Ca-t, Mg-ot és más, a gyógynövények számára szükséges makroelemeket és nyomelemeket is tartalmaz. A túlzott vagy hiányos tápanyagok, illetve a kiegyensúlyozatlan tápanyagarányok befolyásolják a növekedést és fejlődést, valamint a gyógyhatású anyagok minőségét, és a különböző növényeknek eltérő tápanyagigényük van [31,32,33Például az alacsony nitrogénstressz elősegítette az alkaloidok szintézisét az Isatis indigotica-ban, és jótékony hatással volt a flavonoidok felhalmozódására olyan növényekben, mint a Tetrastigma hemsleyanum, a Crataegus pinnatifida Bunge és a Dichondra repens Forst. Ezzel szemben a túl sok nitrogén gátolta a flavonoidok felhalmozódását olyan fajokban, mint az Erigeron breviscapus, az Abrus cantoniensis és a Ginkgo biloba, és befolyásolta a gyógyászati anyagok minőségét [34A foszfor műtrágya alkalmazása hatékonyan növelte a glicirrizinsav és a dihidroaceton tartalmát az uráli édesgyökérben [35Amikor a kijuttatott mennyiség meghaladta a 0,12 kg·m−2-t, a Tussilago farfara teljes flavonoidtartalma csökkent [36A foszfor műtrágya alkalmazása negatívan befolyásolta a hagyományos kínai orvoslásban használt rhizoma polygonati poliszacharid-tartalmát [37], de a K-műtrágya hatékonyan növelte a szaponinok tartalmát [38A kétéves Panax notoginseng növekedéséhez és szaponin-felhalmozódásához a 450 kg·hm−2 K műtrágya kijuttatása volt a legjobb [39]. Az N:P:K = 2:2:1 arány mellett a hidrotermális kivonat, a harpagid és a harpagozid összmennyisége volt a legnagyobb [40A magas N, P és K arány előnyös volt a Pogostemon cablin növekedésének elősegítésére és az illóolaj-tartalom növelésére. Az alacsony N, P és K arány növelte a Pogostemon cablin szárlevél-olajának főbb hatóanyagainak tartalmát [41A YCH egy kopár talajtűrő növény, és speciális igényei lehetnek olyan tápanyagokra, mint a nitrogén, a foszfor és a kálium. Ebben a vizsgálatban a termesztett YCH-hoz képest a vadon élő YCH növények talaja viszonylag kopár volt: a talaj szervesanyag-, összes nitrogén-, összes foszfor- és összes káliumtartalma körülbelül 1/10, 1/2, 1/3 és 1/3 volt a termesztett növényekéhez képest. Ezért a talaj tápanyagtartalmának különbségei lehetnek a termesztett és a vadon élő YCH-ban kimutatott metabolitok közötti különbségek további okai. Weibao Ma és munkatársai [42] megállapította, hogy bizonyos mennyiségű nitrogén- és foszfortrágya kijuttatása jelentősen javította a magvak terméshozamát és minőségét. A tápanyagok hatása a YCH minőségére azonban nem egyértelmű, és a gyógyászati anyagok minőségének javítását célzó trágyázási intézkedések további vizsgálatokra szorulnak.A kínai gyógynövények jellemzője, hogy „a kedvező élőhelyek elősegítik a terméshozamot, a kedvezőtlen élőhelyek pedig javítják a minőséget”.43A vad YCH-ról a termesztett YCH-ra való fokozatos áttérés folyamatában a növények élőhelye a száraz és kopár sivatagi sztyeppéről a bőségesebb vízzel rendelkező termékeny mezőgazdasági területekre változott. A termesztett YCH élőhelye kiválóbb, és a hozam is magasabb, ami segít a piaci kereslet kielégítésében. Ez a kiváló élőhely azonban jelentős változásokhoz vezetett az YCH metabolitjaiban; további kutatásokat igényel, hogy ez elősegíti-e az YCH minőségének javítását, és hogyan lehet tudományosan megalapozott termesztési intézkedésekkel elérni az YCH kiváló minőségű termelését.A szimulációs élőhely-termesztés a vadon termő gyógynövények élőhelyének és környezeti feltételeinek szimulálására szolgáló módszer, amely a növények specifikus környezeti stresszekhez való hosszú távú alkalmazkodásának ismeretén alapul.43A vadon élő növényeket, különösen az autentikus gyógyászati anyagok forrásaként használt növények eredeti élőhelyét befolyásoló különféle környezeti tényezők szimulálásával a megközelítés tudományos tervezést és innovatív emberi beavatkozást alkalmaz a kínai gyógynövények növekedésének és másodlagos anyagcseréjének kiegyensúlyozására [43A módszerek célja a kiváló minőségű gyógyászati anyagok fejlesztésének optimális elrendezése. A szimulatív élőhely-termesztésnek hatékony módot kell biztosítania a YCH kiváló minőségű előállítására, még akkor is, ha a farmakodinámiás alapjai, a minőségi markerek és a környezeti tényezőkre adott válaszmechanizmusok nem egyértelműek. Ennek megfelelően azt javasoljuk, hogy a YCH termesztésében és előállításában a tudományos tervezési és terepi gazdálkodási intézkedéseket a vadon élő YCH környezeti jellemzőinek, például a száraz, kopár és homokos talajviszonyoknak a figyelembevételével kell végrehajtani. Ugyanakkor remélhetőleg a kutatók mélyrehatóbb kutatásokat végeznek a YCH funkcionális anyagbázisával és minőségi markereivel kapcsolatban. Ezek a tanulmányok hatékonyabb értékelési kritériumokat biztosíthatnak a YCH számára, és elősegíthetik az iparág kiváló minőségű termelését és fenntartható fejlődését. -
Gyógynövényes Fructus Amomi olaj Természetes masszázs diffúzorok 1kg-os kimért Amomum villosum illóolaj
A Zingiberaceae család egyre nagyobb figyelmet kap az allelopátiás kutatásokban gazdag illóolajai és tagfajainak aromás jellege miatt. Korábbi kutatások kimutatták, hogy a Curcuma zedoaria (zedoary) vegyi anyagai [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt és RMSm. [41] és a Zingiber officinale Rosc. [42] a gyömbérfélék családjába tartozó növények allelopatikus hatással vannak a kukorica, a saláta és a paradicsom magvainak csírázására és palántanövekedésére. Jelenlegi tanulmányunk az első, amely az A. villosum (a Zingiberaceae család tagja) szárából, leveleiből és fiatal terméséből származó illékony anyagok allelopatikus aktivitásáról számol be. A szárak, levelek és a fiatal termések olajhozama 0,15%, 0,40% és 0,50% volt, ami azt jelzi, hogy a termések nagyobb mennyiségű illóolajat termeltek, mint a szárak és a levelek. A szárakból származó illóolajok fő összetevői a β-pinén, a β-fellandrén és az α-pinén voltak, ami hasonló mintázatot mutatott a levélolaj fő vegyi anyagaihoz, a β-pinénhez és az α-pinénhez (monoterpén szénhidrogének). Másrészt a fiatal termésekben lévő olaj gazdag volt bornil-acetátban és kámforban (oxigénezett monoterpének). Az eredményeket alátámasztották Do N Dai [30,32] és Hui Ao [31], akik azonosították az A. villosum különböző szerveiből származó olajokat.
Számos beszámoló született ezen fő vegyületek növényi növekedést gátló hatásáról más fajokban. Shalinder Kaur megállapította, hogy az eukaliptuszból származó α-pinén 1,0 μL koncentrációban jelentősen csökkentette az Amaranthus viridis L. gyökérhosszát és hajtásmagasságát [43], és egy másik tanulmány kimutatta, hogy az α-pinén gátolja a korai gyökérnövekedést és oxidatív károsodást okoz a gyökérszövetben a reaktív oxigénfajok fokozott termelődése révén [44Egyes jelentések szerint a β-pinén dózisfüggő módon gátolta a tesztgyomok csírázását és palántanövekedését a membrán integritásának megzavarásával [45], megváltoztatva a növény biokémiáját és fokozva a peroxidázok és polifenol-oxidázok aktivitását [46A β-fellandrén 600 ppm koncentrációban maximális gátló hatást mutatott a Vigna unguiculata (L.) Walp csírázására és növekedésére [47], míg 250 mg/m3 koncentrációban a kámfor gátolta a Lepidium sativum L. gyököcskéjének és hajtásnövekedését. [48]. A bornil-acetát allelopátiás hatásáról szóló kutatások azonban kevés helyen állnak rendelkezésre. Tanulmányunkban a β-pinén, a bornil-acetát és a kámfor allelopátiás hatása a gyökér hosszára gyengébb volt, mint az illóolajok esetében, kivéve az α-pinént, míg az α-pinénben gazdag levélolaj fitotoxikusabb volt, mint az A. villosum szárából és terméséből származó megfelelő illóolajok, mindkét eredmény arra utal, hogy az α-pinén lehet a faj allelopátiájában fontos vegyi anyag. Ugyanakkor az eredmények azt is sugallták, hogy a termés olajában található egyes, nem bőségesen jelen lévő vegyületek hozzájárulhatnak a fitotoxikus hatás kialakulásához, ami további kutatásokat igényel a jövőben.Normál körülmények között az allelokemikáliák allelopatikus hatása fajspecifikus. Jiang és munkatársai azt találták, hogy az Artemisia sieversia által termelt illóolaj erősebb hatást gyakorolt az Amaranthus retroflexus L.-re, mint a Medicago sativa L.-re, a Poa annua L.-re és a Pennisetum alopecuroides (L.) Sprengre. [49]. Egy másik tanulmányban a Lavandula angustifolia Mill. illóolaja különböző mértékű fitotoxikus hatást fejtett ki a különböző növényfajokra. A Lolium multiflorum Lam. volt a legérzékenyebb akceptorfaj, a hipokotil és a gyökök növekedését 87,8%-kal, illetve 76,7%-kal gátolta 1 μL/ml olaj dózisban, de az uborkapalánták hipokotil növekedését alig befolyásolta [20]. Eredményeink azt is kimutatták, hogy az L. sativa és az L. perenne között különbség volt az A. villosum illékony anyagaival szembeni érzékenységben.Ugyanazon faj illékony vegyületei és illóolajai mennyiségileg és/vagy minőségileg változhatnak a növekedési körülmények, a növényi részek és a kimutatási módszerek miatt. Például egy jelentés kimutatta, hogy a Sambucus nigra leveleiből kibocsátott illékony anyagok fő vegyületei a piranoid (10,3%) és a β-kariofillén (6,6%) voltak, míg a levelekből kivont olajokban a benzaldehid (17,8%), az α-bulnezén (16,6%) és a tetrakozán (11,5%) volt nagy mennyiségben jelen [50]. Tanulmányunkban a friss növényi anyagok által felszabadított illékony vegyületek erősebb allelopatikus hatást gyakoroltak a tesztnövényekre, mint a kivont illékony olajok, a válaszreakciók közötti különbségek szorosan összefüggtek a két készítményben jelen lévő allelokémiai anyagok különbségeivel. Az illékony vegyületek és az olajok közötti pontos különbségeket a későbbi kísérletekben kell tovább vizsgálni.Az illékony olajokkal kezelt talajmintákban a mikrobiális sokféleség és a mikrobiális közösség szerkezetének különbségei összefüggésben álltak a mikroorganizmusok közötti versengéssel, valamint az illékony olajok talajban való jelenlétének esetleges toxikus hatásaival és időtartamával. Vokou és Liotiri [51] megállapította, hogy négy illóolaj (0,1 ml) egyenkénti alkalmazása művelt talajhoz (150 g) aktiválta a talajminták légzését, még az olajok kémiai összetételükben is különböztek, ami arra utal, hogy a növényi olajokat a talajban előforduló mikroorganizmusok szén- és energiaforrásként használják. A jelenlegi vizsgálatból származó adatok megerősítették, hogy az A. villosum teljes növényéből származó olajok hozzájárultak a talajgombafajok számának nyilvánvaló növekedéséhez az olaj hozzáadása utáni 14. napra, ami arra utal, hogy az olaj szénforrást biztosíthat további talajgombák számára. Egy másik tanulmány egy olyan megállapításról számolt be, hogy a talajmikroorganizmusok visszanyerték kezdeti funkciójukat és biomasszájukat a Thymbra capitata L. (Cav) olaj hozzáadása által kiváltott átmeneti változási időszak után, de a legmagasabb dózisú olaj (0,93 µL olaj/gramm talaj) nem tette lehetővé a talajmikroorganizmusok számára, hogy visszanyerjék kezdeti funkcionalitásukat [52]. A jelenlegi tanulmányban a talaj különböző napokkal és koncentrációkkal történő kezelését követő mikrobiológiai elemzése alapján azt feltételeztük, hogy a talajbaktérium-közösség több nap után helyreáll. Ezzel szemben a gombamikrobiota nem tud visszatérni eredeti állapotába. A következő eredmények megerősítik ezt a hipotézist: a főkoordináta-analízis (PCoA) feltárta az olaj magas koncentrációjának a talajgomba-mikrobiom összetételére gyakorolt különös hatását, és a hőtérkép-bemutatások ismét megerősítették, hogy a 3,0 mg/ml olajjal (nevezetesen 0,375 mg olaj grammonként) kezelt talaj gombaközösségének összetétele nemzetségszinten jelentősen eltért a többi kezeléstől. Jelenleg még kevés kutatás foglalkozik a monoterpén szénhidrogének vagy oxigénezett monoterpének hozzáadásának a talajmikrobiális sokféleségre és a közösség szerkezetére gyakorolt hatásával. Néhány tanulmány arról számolt be, hogy az α-pinén alacsony nedvességtartalom mellett növelte a talajmikrobiális aktivitást és a Methylophilaceae (metilotrófok, proteobaktériumok csoportja) relatív abundanciáját, fontos szerepet játszva szénforrásként a szárazabb talajokban [53Hasonlóképpen, az A. villosum teljes növényének illóolaja, amely 15,03% α-pinént tartalmaz (Kiegészítő táblázat S1) nyilvánvalóan növelte a proteobaktériumok relatív abundanciáját 1,5 mg/ml és 3,0 mg/ml koncentrációban, ami arra utal, hogy az α-pinén valószínűleg a talajmikroorganizmusok egyik szénforrásaként működik.Az A. villosum különböző szervei által termelt illékony vegyületek eltérő mértékű allelopatikus hatást gyakoroltak az L. sativa és az L. perenne növényekre, ami szorosan összefüggött az A. villosum növényi részeiben található kémiai összetevőkkel. Bár az illóolaj kémiai összetétele megerősítést nyert, az A. villosum által szobahőmérsékleten kibocsátott illékony vegyületek ismeretlenek, amelyek további vizsgálatokat igényelnek. Ezenkívül a különböző allelokemikáliák közötti szinergikus hatás is érdemes megfontolást igényel. A talajmikroorganizmusok tekintetében az illóolaj talajmikroorganizmusokra gyakorolt hatásának átfogó feltárásához további mélyreható kutatásokra van szükség: az illóolaj kezelési idejének meghosszabbítására és az illóolaj kémiai összetételének változásainak megállapítására a talajban a különböző napokon. -
Tiszta Artemisia capillaris olaj gyertya- és szappankészítéshez, nagykereskedelmi diffúzor illóolaj, új, nádégős diffúzorokhoz
Rágcsáló modell kialakítása
Az állatokat véletlenszerűen öt, egyenként tizenöt egérből álló csoportra osztottuk. A kontrollcsoport és a modellcsoport egereit szondán keresztül tápláltukszezámolaj6 napig. A pozitív kontrollcsoport egereit bifendát tablettákkal (BT, 10 mg/kg) etették szondán keresztül 6 napig. A kísérleti csoportokat 100 mg/kg és 50 mg/kg szezámolajban oldott AEO-val kezelték 6 napig. A 6. napon a kontrollcsoportot szezámolajjal kezelték, míg az összes többi csoportot egyetlen dózisú 0,2%-os CCl4 szezámolajban oldott oldattal (10 ml/kg) kezelték.intraperitoneális injekcióAz egereket ezután éheztették, és megvonták tőlük a vizet, majd vérmintákat vettek a retrobulbáris erekből; a begyűjtött vért 3000 × centrifugálással centrifugálták.g10 percig, hogy a szérum elváljon.Nyaki diszlokációA vérvétel után azonnal elvégezték a vizsgálatot, és a májmintákat azonnal eltávolították. A májminta egy részét azonnal -20 °C-on tárolták az elemzésig, egy másik részét pedig kimetszették és 10%-osformalinoldat; a fennmaradó szöveteket -80 °C-on tároltuk hisztopatológiai elemzés céljából (Wang és mtsai., 2008,Hsu és mtsai., 2009,Nie és mtsai., 2015).
A szérum biokémiai paramétereinek mérése
A májkárosodást a következő becsléssel értékelték:enzimatikus aktivitásokA szérum ALT és AST szintjének meghatározása a megfelelő kereskedelmi forgalomban kapható készletek segítségével történt a készletek utasításai szerint (Nanjing, Jiangsu tartomány, Kína). Az enzimaktivitásokat literenkénti egységben (U/l) fejeztük ki.
MDA, SOD, GSH és GSH-P mérésexmájhomogenizátumokban
A májszöveteket hideg fiziológiás sóoldattal homogenizáltuk 1:9 arányban (m/v, máj:sóoldat). A homogenizátumokat centrifugáltuk (2500 ×g10 percig), hogy összegyűjtsük a felülúszókat a későbbi meghatározásokhoz. A májkárosodást az MDA és GSH szintek, valamint az SOD és GSH-P májban mért értékei alapján értékeltük.xaktivitásokat. Mindezeket a készleten található utasítások szerint határoztuk meg (Nanjing, Jiangsu tartomány, Kína). Az MDA és GSH eredményeit nmol/mg fehérje (nmol/mg protein) mértékegységben, az SOD és GSH-P aktivitását pedigxU/mg fehérje (U/mg protein) értékben fejeztük ki.
Hisztopatológiai elemzés
A frissen nyert máj egyes részeit 10%-os pufferolt oldatban fixálták.paraformaldehidfoszfátoldattal. A mintát ezután paraffinba ágyazták, 3–5 μm-es metszetekre vágták, éshematoxilinéseozin(H&E) standard eljárás szerint, majd végül elemezvefénymikroszkópia(Tian és mtsai., 2012).
Statisztikai elemzés
Az eredményeket átlag ± szórás (SD) formájában fejeztük ki. Az eredményeket az SPSS Statistics statisztikai program 19.0 verziójával elemeztük. Az adatokat varianciaanalízisnek (ANOVA,p< 0,05), majd Dunnett-tesztet és Dunnett T3-tesztet alkalmaztunk a különböző kísérleti csoportok értékei közötti statisztikailag szignifikáns különbségek meghatározására. A szignifikáns különbséget a következő szinten tekintettük:p< 0,05.
Eredmények és megbeszélés
Az AEO összetevői
GC/MS analízis során az AEO 25 alkotóelemet tartalmazott 10-35 perc között eluálva, és 21 alkotóelemet azonosítottak, amelyek az illóolaj 84%-át tették ki (1. táblázat). Az illékony olaj tartalmazottmonoterpenoidok(80,9%), szeszkviterpenoidok (9,5%), telített, elágazás nélküli szénhidrogének (4,86%) és vegyes acetilén (4,86%). Más tanulmányokkal összehasonlítva (Guo és mtsai., 2004), az AEO-ban bőséges monoterpenoidokat (80,90%) találtunk. Az eredmények azt mutatták, hogy az AEO leggyakoribb összetevője a β-citronellol (16,23%). Az AEO egyéb fő összetevői közé tartozik az 1,8-cineol (13,9%),kámfor(12,59%),linalool(11,33%), α-pinén (7,21%), β-pinén (3,99%),timol(3,22%), ésmircén(2,02%). A kémiai összetétel változása összefüggésben állhat a növényt érő környezeti feltételekkel, például az ásványvízzel, a napfénynel, a fejlődési szakaszsal és a...táplálás.
-
Tiszta Saposhnikovia divaricata olaj gyertya- és szappankészítéshez, nagykereskedelmi illóolaj diffúzorhoz, új, nádégős diffúzorokhoz
2.1. Az SDE előkészítése
Az SD rizómáit szárított gyógynövényként vásárolták a Hanherb Co.-tól (Guri, Korea). A növényi anyagok taxonómiai besorolását Dr. Go-Ya Choi, a Koreai Keleti Orvostudományi Intézet (KIOM) munkatársa végezte. Egy 2014 SDE-6 számú példányt helyeztek el a Koreai Standard Gyógynövényes Erőforrások Herbáriumában. 320 g szárított SD rizómát kétszer extraháltak 70%-os etanollal (2 órás reflux mellett), majd a kivonatot csökkentett nyomáson bepárolták. A főzetet szűrték, liofilizálták és 4°C-on tárolták. A nyers kiindulási anyagokból a szárított kivonat hozama 48,13% (t/t) volt.
2.2. Kvantitatív nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás (HPLC) analízis
A kromatográfiás analízist HPLC rendszerrel (Waters Co., Milford, MA, USA) és fotodiódasoros detektorral végeztük. Az SDE HPLC analíziséhez az elsődlegesOA -glükozil-cimifugin standardot a Korea Promotion Institute for Traditional Medicine Industry-től (Gyeongsan, Korea) vásároltuk, éssec-O-glükozilhamaudol és 4′-O-β-D-glükozil-5-OA -metilvisamminolt laboratóriumunkban izoláltuk, és spektrális analízissel, elsősorban NMR és MS módszerrel azonosítottuk.
Az SDE mintákat (0,1 mg) 70%-os etanolban (10 ml) oldottuk fel. A kromatográfiás elválasztást XSelect HSS T3 C18 oszlopon (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). A mozgófázis acetonitrilből (A) és 0,1%-os ecetsav vízben oldott oldatából (B) állt, 1,0 ml/perc áramlási sebességgel. Többlépéses gradiens programot alkalmaztunk a következőképpen: 5% A (0 perc), 5–20% A (0–10 perc), 20% A (10–23 perc) és 20–65% A (23–40 perc). A detektálási hullámhosszt 210–400 nm-en szkenneltük, és 254 nm-en regisztráltuk. A befecskendezési térfogat 10,0μL. Három kromon meghatározására standard oldatokat készítettünk 7,781 mg/ml végkoncentrációban (prim-O-glükozil-cimifugin), 31,125 mg/ml (4′-)O-β-D-glükozil-5-O-metilvisamminol), és 31,125 mg/ml (sec-O-glükozilhamaudol) metanolban és 4°C-on tárolva.
2.3. Gyulladáscsökkentő hatás értékeléseIn vitro
2.3.1. Sejttenyészet és mintakezelés
A RAW 264.7 sejteket az American Type Culture Collection-től (ATCC, Manassas, VA, USA) szereztük be, és 1% antibiotikumot és 5,5% FBS-t tartalmazó DMEM táptalajban tenyésztettük. A sejteket 5% CO2-t tartalmazó párásított atmoszférában inkubáltuk 37°C-on. A sejtek stimulálásához a táptalajt friss DMEM táptalajra cseréltük, és lipopoliszacharidot (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) adtunk hozzá 1μg/ml-t adtunk hozzá SDE jelenlétében vagy hiányában (200 vagy 400μg/ml) további 24 órán át.
2.3.2. Nitrogén-monoxid (NO), prosztaglandin E2 (PGE2), tumornekrózis-faktor meghatározásaα(TNF-α), és az interleukin-6 (IL-6) termelése
A sejteket SDE-vel kezeltük, majd 24 órán át LPS-sel stimuláltuk. Az NO-termelést a nitrit Griess-reagenssel történő mérésével elemeztük egy korábbi tanulmány szerint [12]. A gyulladásos citokinek, a PGE2 és a TNF szekréciójaα, és az IL-6-ot ELISA kittel (R&D systems) határoztuk meg a gyártó utasításai szerint. Az SDE NO-ra és citokintermelésre gyakorolt hatását 540 nm-en vagy 450 nm-en határoztuk meg Wallac EnVision készülékkel.™mikrotiterlemez-leolvasó (PerkinElmer).
2.4. Az osteoarthritis elleni aktivitás értékeléseIn vivo
2.4.1. Állatok
A hím Sprague-Dawley patkányokat (7 hetesek) a Samtako Inc.-től (Osan, Korea) vásároltuk, és szabályozott körülmények között, 12 órás fény/sötétség ciklusban tartottuk őket.°C és% páratartalom. A patkányok laboratóriumi táplálékot és vizet kaptak.korlátlanulMinden kísérleti eljárást a Nemzeti Egészségügyi Intézetek (NIH) irányelveinek megfelelően végeztek, és a Daejeon Egyetem (Daejeon, Koreai Köztársaság) Állatgondozási és Felhasználási Bizottsága hagyta jóvá.
2.4.2. OA kiváltása MIA-val patkányokban
Az állatokat a vizsgálat megkezdése előtt véletlenszerűen osztották be kezelési csoportokba (csoportonként). MIA oldat (3 mg/50μKetamin és xilazin keverékével kiváltott altatásban 0,9%-os sóoldatot (l) injektáltak közvetlenül a jobb térd ízületi terébe. A patkányokat véletlenszerűen négy csoportra osztották: (1) sóoldatos csoport MIA injekció nélkül, (2) MIA csoport MIA injekcióval, (3) SDE-vel kezelt csoport (200 mg/kg) MIA injekcióval, és (4) indometacinnal (IM) kezelt csoport (2 mg/kg) MIA injekcióval. A patkányoknak szájon át SDE-t és IM-t adtak be 1 héttel a MIA injekció előtt 4 héten keresztül. Az ebben a vizsgálatban alkalmazott SDE és IM dózisok a korábbi vizsgálatokban alkalmazottakon alapultak [10,13,14].
2.4.3. A hátsó mancs súlyeloszlásának mérése
Az OA indukciója után a hátsó mancsok súlytartó képességének eredeti egyensúlya felborult. A súlytartó tolerancia változásainak értékelésére egy cselekvőképtelenségi tesztert (Linton instrumentation, Norfolk, Egyesült Királyság) használtak. A patkányokat óvatosan helyezték a mérőkamrába. A hátsó végtag által kifejtett súlytartó erőt 3 másodperces időszakra átlagolták. A súlyeloszlási arányt a következő egyenlettel számították ki: [jobb hátsó végtag súlya / (jobb hátsó végtag súlya + bal hátsó végtag súlya)] × 100 [15].
2.4.4. Szérum citokinszintek mérése
A vérmintákat 1500 g-vel centrifugáltuk 10 percig 4°C-on; majd a szérumot összegyűjtöttük és felhasználásig -70°C-on tároltuk. Az IL-1 szintje aβ, IL-6, TNF-αA szérumban a PGE2 és a PGE2 szintjét az R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) ELISA kitjeivel mérték a gyártó utasításai szerint.
2.4.5. Valós idejű kvantitatív RT-PCR analízis
A térdízületi szövetből teljes RNS-t vontunk ki TRI reagenssel® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), reverz transzkripcióval cDNS-sé alakítottuk, majd PCR-amplifikációt végeztünk TM One Step RT PCR kittel és SYBR green festékkel (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). A valós idejű kvantitatív PCR-t az Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR rendszerrel (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA) végeztük. A primer szekvenciákat és a próba szekvenciáját a táblázat mutatja.1A minta cDNS-ek alikvot részeit és azonos mennyiségű GAPDH cDNS-t amplifikáltunk TaqMan® Universal PCR master keverékkel, amely DNS polimerázt tartalmazott, a gyártó utasításai szerint (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). A PCR körülmények a következők voltak: 2 perc 50°C-on, 10 perc 94°C-on, 15 másodperc 95°C-on és 1 perc 60°C-on, 40 cikluson keresztül. A célgén koncentrációját az összehasonlító Ct (küszöbérték ciklusszám az amplifikációs görbe és a küszöbérték közötti keresztezési ponton) módszerrel határoztuk meg, a gyártó utasításai szerint.
